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步驟1：預先打開培養箱的開關，設定溫度為20℃（要求培養箱恒溫變化范圍為±1℃）。 步驟2：將樣品加熱或冷卻至實驗溫度（通常為20℃），溫度波動范圍在±2℃以內。 步驟3：曝氣1小時或攪拌半小時，使水樣溶解氧飽和（20℃左右）。 步驟4：必要時加入1mL B1試劑、3mL B2試劑，如需要可添加2mL硝化抑制劑。 步驟5：根據量筒準確測量預處理后pH值約為7.2的水樣。 步驟6：將水樣通過漏斗轉移到培養瓶中。 步驟7：將干凈的攪拌轉子放入培養瓶中。 步驟8：將干凈的密封杯放入培養瓶中。（為保證密封，可在密封杯的上下兩側涂抹適量的真空硅脂）。 步驟9：通過漏斗將 3/4 勺（約 0.6g）的CO2 吸收劑填充到密封杯中。 步驟10：擰緊培養瓶編號對應的瓶蓋，將培養瓶依次放置在測定儀主機上。 步驟11：小心緩慢地將測定儀主機移入培養箱中，連接電源線，打開開關進行參數設置。 步驟12：實驗完成后，應將培養瓶、密封杯和攪拌轉子徹底清洗干凈并放置一旁待用。 注意： 1、預先估算待測樣品的BOD值。如果無法估算，可以借助化學需氧量（CODCr）進行計算。一般根據化學需氧量（CODCr）的70%的近似濃度范圍計算BOD的量。根據水樣的數量和8個培養瓶的數量，選擇要制備的平行樣品的數量。水樣必須經過預處理，其PH值應在7.2左右。 2、如果 CO2 吸收劑進入樣品，應丟棄樣品并準備新樣品。注意每瓶均配密封蓋和管子，瓶蓋不能擰錯，否則數據與瓶內水樣不對應。 3、如果培養瓶中的轉子轉動不好，輕輕搖晃瓶子使其轉動，但不要搖晃太多，以免CO2吸收劑進入入水樣中。 4、正常測量時，恒溫等待時間不能低于1小時，也不能高于3小時，否則會影響測量結果。環境溫度接近20℃時，選擇恒溫1小時，與20℃溫差較大時，可在該范圍內適當延長恒溫等待時間。 5、數據處理，儀器可根據設定的采樣量直接讀取濃度。用戶只需對同一樣品的平行樣品取平均值，即可得到該水樣的BOD值。 6、清洗培養瓶、密封杯和轉子時，好的方法是用機械方法清除污垢，有條件的可以使用超聲波清洗機進行清洗。
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