BOD(生化需氧量)測(cè)定儀通過監(jiān)測(cè)微生物降解有機(jī)物的耗氧量評(píng)估水體污染程度,其檢測(cè)精度依賴校準(zhǔn)液的準(zhǔn)確性。BOD校準(zhǔn)液需模擬含可降解有機(jī)物的水體環(huán)境,且成分穩(wěn)定、濃度可控,通常分為標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(高濃度、長(zhǎng)期保存)與工作校準(zhǔn)液(低濃度、適配儀器量程),需遵循“無(wú)菌、避光、控溫”原則配制,避免因成分變質(zhì)或操作不當(dāng)導(dǎo)致校準(zhǔn)失效。 一、配制前的準(zhǔn)備工作 1、物資與器具準(zhǔn)備 試劑需選用基準(zhǔn)級(jí)葡萄糖、谷氨酸(BOD校準(zhǔn)液常用有機(jī)物,兩者按比例混合可模擬天然有機(jī)物降解特性),且在有效期內(nèi),避免使用受潮、結(jié)塊的試劑;器具需準(zhǔn)備容量瓶(定容用)、移液管(精準(zhǔn)移取)、燒杯(溶解混合)、玻璃棒(攪拌),所有器具需用蒸餾水浸泡清潔后晾干,若曾接觸過殺菌劑(如次氯酸鈉),需用無(wú)菌水反復(fù)沖洗,防止殘留殺菌劑抑制微生物活性。 此外,需準(zhǔn)備無(wú)菌密封試劑瓶(儲(chǔ)存校準(zhǔn)液,避免微生物污染)、標(biāo)簽紙(標(biāo)注類型、配制日期、有效期),以及無(wú)菌水(用于稀釋,不可用普通蒸餾水,需經(jīng)滅菌處理,防止雜菌影響校準(zhǔn))。 2、環(huán)境與安全準(zhǔn)備 配制需在潔凈、室溫(20℃左右,接近BOD檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)溫度)環(huán)境中進(jìn)行,避免高溫、強(qiáng)光直射(防止葡萄糖、谷氨酸分解);若環(huán)境灰塵較多,需在超凈工作臺(tái)或無(wú)菌操作區(qū)進(jìn)行,防止空氣中雜菌落入校準(zhǔn)液。個(gè)人需佩戴無(wú)菌手套、口罩,避免手部細(xì)菌或飛沫污染試劑,操作時(shí)禁止交談,減少污染風(fēng)險(xiǎn)。 二、核心配制步驟 1、標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的配制 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液濃度較高,用于后續(xù)稀釋成工作液,步驟如下: 試劑稱量與溶解:按比例稱取葡萄糖與谷氨酸(兩者濃度比例需一致,確保降解特性穩(wěn)定),放入無(wú)菌燒杯中,加入適量無(wú)菌水,用無(wú)菌玻璃棒輕輕攪拌至完全溶解(避免劇烈攪拌產(chǎn)生氣泡,氣泡易攜帶雜菌);若溶解緩慢,可將燒杯置于20℃水浴中恒溫?cái)嚢?,禁止加熱(高溫?huì)破壞試劑結(jié)構(gòu))。 精準(zhǔn)定容與滅菌:將溶解后的溶液沿玻璃棒緩慢注入無(wú)菌容量瓶,用無(wú)菌水多次沖洗燒杯與玻璃棒,沖洗液全部倒入容量瓶;加無(wú)菌水至刻度線,蓋緊瓶塞顛倒搖勻,隨后將溶液轉(zhuǎn)移至無(wú)菌密封試劑瓶,進(jìn)行滅菌處理(如高壓蒸汽滅菌,需按試劑耐受溫度設(shè)置,避免過度滅菌導(dǎo)致試劑分解)。 密封儲(chǔ)存:滅菌后待溶液冷卻至室溫,貼上標(biāo)簽(標(biāo)注“BOD標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液”“配制日期”“有效期”,儲(chǔ)備液密封避光可保存1-2周),置于4℃冰箱冷藏,避免反復(fù)凍融導(dǎo)致濃度變化。 2、工作校準(zhǔn)液的配制 工作校準(zhǔn)液需根據(jù)bod測(cè)定儀量程配制(如儀器量程為0-200mg/L,工作液濃度可設(shè)為0mg/L、50mg/L、100mg/L、200mg/L),步驟如下: 稀釋儲(chǔ)備液:用無(wú)菌移液管精準(zhǔn)移取一定量標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,注入無(wú)菌容量瓶中,避免移液管尖端觸碰瓶壁(防止污染);若儲(chǔ)備液冷藏保存,需先放置至室溫再稀釋,避免溫度差異導(dǎo)致體積誤差。 無(wú)菌定容與混勻:向容量瓶中加無(wú)菌水至刻度線,蓋塞后輕輕顛倒搖勻(BOD校準(zhǔn)液需避免劇烈震蕩,防止混入過多氧氣影響后續(xù)微生物耗氧檢測(cè)),確保濃度均勻。 即時(shí)使用:工作校準(zhǔn)液需現(xiàn)配現(xiàn)用,配制后1小時(shí)內(nèi)完成校準(zhǔn),避免放置時(shí)間過長(zhǎng)導(dǎo)致微生物滋生(即使無(wú)菌操作,環(huán)境中仍可能有微量雜菌,長(zhǎng)期放置會(huì)分解有機(jī)物,導(dǎo)致濃度下降)。 三、關(guān)鍵注意事項(xiàng) 1、防污染:保障校準(zhǔn)液“無(wú)菌性” BOD校準(zhǔn)液的核心是模擬純凈有機(jī)物環(huán)境,雜菌會(huì)直接分解有機(jī)物,導(dǎo)致濃度失真:配制全程需使用無(wú)菌器具與無(wú)菌水,避免手部、空氣接觸污染;若配制過程中溶液出現(xiàn)渾濁、異味,說(shuō)明已污染,需立即丟棄重新配制。 2、防分解:把控試劑穩(wěn)定性 葡萄糖、谷氨酸易受光照、高溫分解,配制時(shí)需避光操作,儲(chǔ)存時(shí)冷藏;稀釋時(shí)禁止加熱,若試劑溶解困難,僅可在20℃水浴中輔助溶解,防止溫度過高破壞試劑。 3、空白校準(zhǔn)液:不可忽視的“零濃度”基準(zhǔn) 空白校準(zhǔn)液(0mg/L)用于消除無(wú)菌水自身耗氧影響,配制方法為直接取無(wú)菌水裝入校準(zhǔn)瓶,無(wú)需添加任何試劑;需確保空白液與工作液滅菌、儲(chǔ)存條件一致,避免因空白液污染或耗氧導(dǎo)致校準(zhǔn)偏差。 四、總結(jié) BOD測(cè)定儀校準(zhǔn)液的配制核心是“無(wú)菌、穩(wěn)定、精準(zhǔn)”,需通過無(wú)菌操作避免雜菌污染,控制溫度與光照防止試劑分解,按量程分階段配制儲(chǔ)備液與工作液。只有嚴(yán)格遵循配制規(guī)范,才能確保校準(zhǔn)液濃度準(zhǔn)確,為BOD測(cè)定儀提供可靠校準(zhǔn)基準(zhǔn),保障水體生化需氧量檢測(cè)數(shù)據(jù)的真實(shí)性。
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