BOD（生化需氧量）是反映水體中可生物降解有機物含量的重要指標，bod測定儀通過模擬自然環境中微生物的代謝過程，測量水體在一定時間內的耗氧量。為保證測定結果的準確性和可比性，測量過程需遵循嚴格的要求，覆蓋樣品處理、儀器操作、環境控制等多個環節。

一、樣品采集與預處理要求

樣品的代表性是BOD測定的基礎。采集水樣時，需使用清潔、無污染的容器（如玻璃瓶），避免容器內壁殘留的洗滌劑、有機物等干擾微生物活性。采樣過程中應充滿容器并密封，減少樣品與空氣接觸，防止溶解氧含量變化——尤其是厭氧水樣，需在采樣后立即隔絕空氣，避免氧氣進入影響后續耗氧測量。

樣品預處理需根據水質特性調整。若水樣中含有余氯（如自來水、消毒后的廢水），需加入硫代硫酸鈉去除，余氯會抑制微生物活性，導致BOD值偏低，加入量需通過預實驗確定，確保完全中和余氯且不引入過量干擾物質。對于渾濁水樣，需通過靜置沉淀或低轉速離心去除大顆粒懸浮物，避免顆粒物附著微生物或消耗氧氣，影響測定結果。

水樣的pH值需調節至適宜范圍。微生物在pH6.5-7.5的環境中活性最佳，若水樣過酸或過堿，需用稀鹽酸或氫氧化鈉溶液調節pH至中性，調節過程中需緩慢攪拌，避免局部酸堿度劇烈變化損傷微生物。此外，對于含高濃度有機物的水樣（如工業廢水），需進行適當稀釋，使測定過程中的耗氧量在儀器檢測范圍內（通常5-20mg/L），稀釋用水需為經曝氣除氯的純水，并加入適量營養鹽（如磷酸鹽、硫酸鎂），保證微生物代謝需求。

二、儀器操作規范要求

儀器的校準與調試是測量前的必要步驟。使用BOD測定儀前，需檢查溶解氧電極或壓力傳感器的靈敏度，用飽和溶解氧水（如20℃下充分曝氣的純水）校準溶解氧讀數，確保誤差在允許范圍內（通常±0.1mg/L）。若采用壓差法測定儀，需檢查密封系統的氣密性，將充滿水的培養瓶連接至儀器，觀察壓力變化是否穩定，若存在漏氣，需更換密封墊或緊固接口，防止外界空氣進入影響壓力測量。

培養條件的控制需嚴格遵循標準。BOD測定通常需要在20℃±1℃的黑暗環境中培養5天（即BOD5），溫度波動過大會影響微生物代謝速率，導致耗氧量偏差，因此需確保培養箱或恒溫水浴的溫度穩定性，定期校準溫控系統。培養過程中需避免樣品瓶受到震動或光照，光照可能促進藻類生長，額外消耗氧氣，導致測定值偏高。

樣品接種與稀釋操作需規范。對于缺乏微生物的水樣（如經過消毒的廢水、地下水），需接種適量的微生物菌種（如市政污水處理廠的活性污泥上清液），接種量通常為水樣體積的1%-5%，確保水樣中微生物濃度適宜。稀釋操作需使用虹吸法，避免劇烈攪拌產生氣泡，稀釋后的水樣需輕輕搖勻，使微生物和有機物分布均勻，同時避免溶解氧含量劇烈變化。

三、環境與試劑要求

實驗環境需滿足微生物活性需求。實驗室溫度應控制在20℃左右，避免溫度劇烈波動影響培養過程；空氣中應避免存在揮發性有機物、消毒劑等物質，防止這些物質進入培養系統抑制微生物活性。若同時進行多個樣品測定，需保證樣品間無交叉污染，操作工具（如移液管、燒杯）需嚴格清洗消毒，避免殘留物質干擾。

試劑的質量與保存直接影響測定結果。稀釋用水需符合標準要求，需經曝氣去除二氧化碳和揮發性有機物，同時加入磷酸鹽緩沖液、硫酸鎂、氯化鈣等營養鹽，維持水樣的滲透壓和營養平衡，試劑需現配現用，或在4℃下冷藏保存，有效期不超過1周。接種用的微生物菌種需保持活性，若使用商業化菌種，需嚴格按照說明書保存和活化，避免菌種老化或失活。

標準溶液的使用需規范。校準儀器或驗證方法時，需使用葡萄糖-谷氨酸標準溶液（BOD5理論值為198mg/L），標準溶液需現配現用，保存時間不超過24小時。通過測定標準溶液的BOD值，驗證儀器和操作的準確性，若標準溶液測定值與理論值偏差超過±10%，需查找原因（如試劑失效、溫度控制不當）并重新測定。

四、質量控制與數據記錄要求

質量控制措施需貫穿測量全過程。每批樣品測定時，需同時做空白實驗（僅稀釋水和接種液），空白BOD值應小于1.5mg/L，若空白值過高，說明稀釋水或接種液被污染，需重新制備。同時需做平行樣測定，平行樣的相對偏差應小于10%，確保操作的重復性，若偏差過大，需檢查稀釋、接種等環節是否存在操作誤差。

數據記錄與處理需完整準確。記錄內容應包括樣品信息（采樣時間、地點、保存條件）、測定參數（稀釋倍數、接種量、培養溫度）、儀器讀數、環境條件等，培養前后的溶解氧或壓力變化需準確記錄，按照標準公式計算BOD值。數據處理時需扣除空白值和接種液的耗氧量，確保計算結果的準確性。

測定后的樣品與儀器處理需規范。培養結束后，樣品需妥善處理，避免環境污染；儀器需及時清潔，溶解氧電極需按照說明書保養（如浸泡在飽和氯化鉀溶液中），壓力傳感器需校準歸零，確保下次使用時性能穩定。長期不用的儀器需做好防潮、防塵處理，定期通電檢查，防止部件老化。

五、總結

BOD測定儀的測量要求涵蓋樣品采集預處理、儀器操作、環境控制、試劑質量、質量控制等多個方面，核心是保證水樣中微生物活性適宜、培養條件穩定、操作規范無干擾。只有嚴格遵循這些要求，才能確保測定結果準確可靠，真實反映水體中可生物降解有機物的含量，為水環境質量評價、污水處理效果評估等提供科學依據。在實際操作中，需結合具體水樣特性和儀器型號，靈活調整操作細節，同時加強質量控制，持續提升測定水平。